Chromatogram voor wat het is en soorten

de chromatogram is een tweedimensionaal grafisch record verkregen in een absorberend medium, dat de scheiding van stoffen door middel van chromatografie laat zien. In het chromatogram wordt een zichtbaar patroon gevormd, pieken of vlekken, die de fysieke scheiding van de componenten van een mengsel weerspiegelen.

Het onderste cijfer is een chromatogram met drie pieken, A, B en C, van drie componenten van het monster gescheiden door chromatografie. Opgemerkt wordt dat elk van de drie pieken een verschillende hoogte en locatie heeft in de tijdas van het chromatogram.

De as van de ordinaten of Y registreert informatie over de signaalsterkte (in dit geval millivolts mV). Vertegenwoordigt het register, afhankelijk van de detector, van een of andere fysische eigenschap van de stof of een afzonderlijk bestanddeel van het mengsel.

De hoogte van de piek is evenredig met de concentratie van de afgescheiden component van het monster in een optimaal systeem. Zo is het bijvoorbeeld gemakkelijk om te visualiseren dat component B groter is dan A en C.

Op de X-as of X-as wordt de retentietijd van de componenten van het monster of mengsel weergegeven. Het is de tijd die verstrijkt vanaf het injecteren van het monster totdat het stopt, omdat het anders is voor elke zuivere substantie.

index

• 1 Waarvoor dient een chromatogram??
  • 1.1 Identificatie van stoffen
  • 1.2 Classificatie van de zuiverheid van stoffen
  • 1.3 Kwantificering van stoffen
• 2 soorten
  • 2.1 Chromatogrammen op papier of dunne film
  • 2.2 Chromatogrammen gegenereerd door detectoren
• 3 referenties

Waar is een chromatogram voor??

Het vormt het laatste record van het gehele chromatografieproces. Hieruit worden parameters verkregen die van analytisch belang zijn. Dit kan worden verkregen als een elektronisch bestand, een gedrukt histogram of in de procesondersteuning; op papier, bijvoorbeeld.

De Y-as wordt gegenereerd door signaaldetectoren of responsintensiteit, zoals spectrofotometers. Een optimale analyse van de tijd, van de kenmerken van de verkregen pieken of vlekken is onmisbaar; de grootte, locatie, kleur, onder andere aspecten.

Analyses van chromatogrammen vereisen over het algemeen het gebruik van controles of normen, substanties van identiteit en bekende concentratie. Met de analyse van deze controles kan worden vastgesteld door vergelijking met de kenmerkende monsters van de componenten van het onderzochte monster.

In het chromatogram kunt u observeren en analyseren hoe de scheiding van de componenten van een mengsel werd uitgevoerd. De optimale studie maakt het mogelijk een stof te identificeren, de zuiverheid ervan aan te tonen, de hoeveelheid stoffen in een mengsel te kwantificeren, onder andere aspecten.

De geëxtraheerde informatie kan van kwalitatieve aard zijn; bijvoorbeeld wanneer stoffen worden geïdentificeerd en hun zuiverheid wordt bepaald. De kwantitatieve informatie heeft betrekking op de bepaling van het aantal componenten van het mengsel en de concentratie van de afzonderlijke analyt.

Identificatie van stoffen

Door de resultaten van het chromatogram te analyseren, kunnen verschillende stoffen worden geïdentificeerd door de retentietijden te vergelijken met die van de bekende stoffen. Er kan worden waargenomen of de onderzochte stoffen dezelfde afstand afleggen als ze dezelfde tijd hebben als de bekende stoffen.

Het chromatogram maakt het bijvoorbeeld mogelijk in de urine metabolieten van metabolieten van atleten, zoals stimulerende middelen en steroïden, te detecteren en te identificeren. Het is een belangrijke ondersteuning bij de studie en het onderzoek van sommige metabolieten die door genetische aandoeningen bij de pasgeborene worden geproduceerd.

Het chromatogram vergemakkelijkt de detectie van gehalogeneerde koolwaterstoffen aanwezig in drinkwater, naast andere stoffen. Het is onmisbaar in de laboratoriumanalyse van kwaliteitscontrole, omdat het de contaminanten die in de verschillende producten aanwezig zijn, kan opsporen en identificeren.

Classificatie van de zuiverheid van stoffen

In een chromatogram kunt u onderscheid maken tussen pure en onzuivere stoffen. Een zuivere substantie zou een enkele piek in het chromatogram produceren; terwijl een onzuivere substantie twee of meer pieken zou produceren.

Door de omstandigheden waaronder chromatografie wordt uitgevoerd voldoende aan te passen, kan worden voorkomen dat twee stoffen een enkele piek vormen.

Kwantificering van stoffen

Door het gebied van de pieken van het chromatogram te analyseren, kan de concentratie van de componenten van het monster worden berekend.

Daarom is het oppervlak van de piek evenredig met de hoeveelheid van de stof die in het monster aanwezig is. Deze kwantitatieve gegevens worden verkregen in zeer gevoelige systemen, zoals die bijvoorbeeld gas- of vloeistofchromatografieën genereren.

type

Een van de classificaties van de chromatogrammen hangt nauw samen met de verschillende soorten chromatografie, die het bijbehorende chromatogram genereren.

Afhankelijk van de uitvoeringsomstandigheden, van de detectoren, zal onder andere het chromatogram variëren in inhoud en kwaliteit.

Chromatogrammen op papier of dunne film

Het chromatogram kan direct op papier of een dunne film worden gegenereerd, waarbij de verdeling of verdeling van de componenten van het monster direct zichtbaar is.

Het is erg handig voor de scheiding en studie van gekleurde stoffen met natuurlijke pigmenten, zoals chlorofyl. Het kan worden onderworpen aan ontwikkelingsprocessen in het geval de stoffen geen natuurlijke kleur hebben en is nuttig voor kwalitatieve studies.

Chromatogrammen gegenereerd door detectoren

Het chromatogram kan ook worden verkregen door een detector te gebruiken die het respons-, uitvoer- of eindsignaal van de chromatografie registreert. Zoals eerder vermeld, is deze detector meestal een spectrofotometer, een massaspectrometer, automatische sequencers, elektrochemicaliën, onder anderen..

Chromatogrammen gegenereerd in kolommen, of het nu gassen of vloeistoffen zijn, of die met een hoge resolutie in dunne laag, gebruiken detectors.

Afhankelijk van het type detector kan het chromatogram worden geclassificeerd als differentieel of integraal, afhankelijk van de reactievorm van de detector.

Differentiaalchromatogram

Een differentiële detector meet continu het responsiesignaal van het chromatogram, terwijl de integrale detectoren cumulatief het overeenkomstige signaal meten.

Een differentiaalchromatogram is een chromatogram dat wordt verkregen door een differentiële detector. Onder deze detectoren kunnen bijvoorbeeld spectrofotometers en detectoren van veranderingen in elektrische geleidbaarheid worden genoemd.

Dit type chromatogram heeft het resultaat van de scheiding van anionen uit een monster aangetoond, gedetecteerd door indirecte fotometrie. Ook zijn dezelfde resultaten verkregen voor de studie van ionen, bijvoorbeeld met uiteindelijke detectie door conductimetrie.

De bovenste grafiek toont het voorbeeld van een differentieelchromatogram, verkregen door automatische DNA-sequencers (deoxyribonucleïnezuur). De grafiek toont duidelijk pieken van vier kleuren, één kleur voor elk van de stikstofhoudende basen.

Door de ondersteuning van een gecomputeriseerd programma wordt de interpretatie van de sequentie van de geanalyseerde DNA-bases vergemakkelijkt, evenals voor meer complexe analyten..

Uitgebreid chromatogram

Het integraalchromatogram komt overeen met dat verkregen door een integrale detector. In dit chromatogram wordt de output van een enkele component die wordt bestudeerd, aangetoond. Geen pieken worden verkregen zoals in het differentieel.

In het integrale chromatogram wordt een record met een vorm die is beschreven als een stap, verkregen. Deze vorm is het gedeelte van het chromatogram dat overeenkomt met de hoeveelheid van een enkele stof die de kolom verlaat.

referenties

1. Bhanot, D. (2013). Hoe te lezen naar Chromatogram? Teruggeplaatst van: lab-training.com
2. Carey, F. A. (2006). Organic Chemistry zesde editie. Mc Graw Hill
3. Chromatografie vandaag. (2014). Wat is een Chromatogram? Teruggeplaatst van: chromatographytoday.com
4. Mathias, J. (2018). Een beginnershandleiding: Gaschromatografie-chromatografie Massaspectrometrie-resultaten interpreteren. Teruggeplaatst van: innovatechlabs.com
5. Spanish Society of Chromatography and Related Techniques. (2014). Het chromatogram. Hersteld van: secyta.es
6. Wikipedia. (2019). Papieren chromatografie. Teruggeplaatst van: wikipedia.org