Nephelometrie in wat het bestaat en toepassingen

de nefelometrie bestaat in het meten van de straling veroorzaakt door deeltjes (in oplossing of in suspensie), waardoor het vermogen van de strooistraling gemeten wordt onder een andere hoek dan de richting van de invallende straling.

Wanneer een deeltje in suspensie wordt bereikt door een lichtstraal, is er een deel van het licht dat wordt gereflecteerd, een ander deel wordt geabsorbeerd, een ander deel wordt omgeleid en de rest wordt uitgezonden. Dat is de reden waarom wanneer het licht een transparant medium raakt waarin zich een suspensie van vaste deeltjes bevindt, de suspensie troebel wordt waargenomen.

index

• 1 Wat is nefelometrie??
  • 1.1 Dispersie van straling door deeltjes in oplossing
  • 1.2 Nephelometer
  • 1.3 Afwijkingen
  • 1.4 Metrologische kenmerken
• 2 toepassingen
  • 2.1 Detectie van immuuncomplexen
  • 2.2 Andere toepassingen
• 3 referenties

Wat is nefelometrie??

Dispersie van straling door deeltjes in oplossing

Op het moment dat een lichtstraal de deeltjes van een stof in suspensie raakt, verandert de richting van voortplanting van de straal van richting. Dit effect hangt af van de volgende aspecten:

1.Afmetingen van het deeltje (grootte en vorm).

2. Kenmerken van de suspensie (concentratie).

3. Golflengte en intensiteit van het licht.

4. Afstand van opvallend licht.

5. Detectiehoek.

6. Brekingsindex van het medium.

nephelometer

De nefelometer is een instrument dat wordt gebruikt om deeltjes te meten die zijn gesuspendeerd in een vloeibaar monster of in een gas. Dus een fotocel geplaatst onder een hoek van 90 ° ten opzichte van een lichtbron detecteert de straling door de deeltjes die in de suspensie aanwezig zijn.

Ook hangt het licht gereflecteerd door de deeltjes naar de fotocel af van de dichtheid van de deeltjes. Diagram 1 presenteert de basiscomponenten waaruit een nefelometer bestaat:

Een. Stralingsbron

Bij nefelometrie is het van vitaal belang om een ​​stralingsbron met een hoge lichtopbrengst te hebben. Er zijn verschillende soorten, variërend van xenonlampen en kwikdamplampen, wolfraam-halogeenlampen, laserstraling.

B. Monochromator-systeem

Dit systeem bevindt zich tussen de stralingsbron en de cuvette, zodat op deze manier de incidentie op de cuvette van straling met verschillende golflengten in vergelijking met de gewenste straling wordt vermeden.

Anders zouden fluorescentiereacties of verwarmingseffecten in de oplossing afwijkingen van de meting veroorzaken.

C. Cuvette lezen

Het is een in het algemeen prismatische of cilindrische houder en kan verschillende afmetingen hebben. In deze is de oplossing in studie.

D. detector

De detector bevindt zich op een specifieke afstand (meestal heel dicht bij de tank) en is verantwoordelijk voor het detecteren van de straling die wordt verspreid door de deeltjes van de suspensie.

E. Leessysteem

Over het algemeen is het een elektronische machine die gegevens ontvangt, converteert en verwerkt, wat in dit geval de metingen zijn die uit de uitgevoerde studie zijn verkregen.

afwijkingen

Elke meting is onderhevig aan een foutenpercentage, dat voornamelijk wordt gegeven door:

Verontreinigde emmers: in cuvettes alle buiten de oplossing onder studie, die zich binnen of buiten het bekken, het middel vermindert de stralende lichtpad naar de detector (defecte cuvettes, stof hechten aan de wanden van het cuvette).

interferenties: de aanwezigheid van een of andere microbiële contaminant of troebelheid verspreidt de stralingsenergie, waardoor de intensiteit van de dispersie toeneemt.

Fluorescerende verbindingen: dit zijn verbindingen die, wanneer ze worden opgewekt door invallende straling, foutieve en hoge aflezingen van de verspreidingsdichtheid veroorzaken.

Behoud van reagentia: de ontoereikende temperatuur van het systeem kan ongunstige omstandigheden in het onderzoek veroorzaken en de aanwezigheid van troebele reagentia of precipitaten veroorzaken.

Fluctuaties in elektrisch vermogen: om te voorkomen dat de invallende straling een bron van fouten is, worden spanningsstabilisatoren aanbevolen voor uniforme straling.

Metrologische kenmerken

Aangezien de stralingsenergie van de gedetecteerde straling is recht evenredig met de massaconcentratie van de deeltjes, nefelometrische studies theoretisch metrologische grotere gevoeligheid dan andere vergelijkbare werkwijzen (zoals turbidimetrie).

Bovendien vereist deze techniek verdunde oplossingen. Hierdoor kunnen zowel absorptie- als reflectieverschijnselen tot een minimum worden beperkt.

toepassingen

Nephelometrische studies nemen een zeer belangrijke plaats in in klinische laboratoria. De toepassingen variëren van de bepaling van immunoglobulinen en eiwitten van acute fase, complement en coagulatie.

Detectie van immuuncomplexen

Wanneer een biologisch monster een antigeen van belang bevat, wordt het gemengd (in een bufferoplossing) met een antilichaam om een ​​immuuncomplex te vormen.

Nephelometrie meet de hoeveelheid licht die wordt verspreid door de antigeen-antilichaamreactie (Ag-Ac), en op deze manier worden immuuncomplexen gedetecteerd.

Deze studie kan op twee manieren worden uitgevoerd:

Nephelometrie van het laatste punt:

Deze techniek kan worden gebruikt voor de analyse van het eindpunt, waarbij het antilichaam van het bestudeerde biologische monster vierentwintig uur wordt geïncubeerd..

Het Ag-Ac-complex wordt gemeten met behulp van een nefelometer en de hoeveelheid verstrooid licht wordt vergeleken met dezelfde meting die werd uitgevoerd vóór de vorming van het complex..

Kinetische nefelometrie

Bij deze methode wordt de snelheid van complexvorming continu gevolgd. De reactiesnelheid hangt af van de concentratie van het antigeen in het monster. Hier worden de metingen als functie van de tijd genomen, dus de eerste meting wordt op het moment "nul" (t = 0) uitgevoerd.

De kinetische nefelometrie is de meest gebruikte techniek, omdat het onderzoek in 1 uur kan worden uitgevoerd, in vergelijking met de lange tijdsperiode van de eindpuntmethode. De dispersieverhouding wordt gemeten vlak na het toevoegen van het reagens.

Daarom is, zolang het reagens constant is, de hoeveelheid antigeen die aanwezig is, direct evenredig aan de veranderingssnelheid.

Andere toepassingen

Nephelometrie wordt over het algemeen gebruikt in de analyse van waterchemische kwaliteit, voor het bepalen van de duidelijkheid en voor het beheersen van de processen van de behandeling.

Het wordt ook gebruikt om luchtvervuiling te meten, waarbij de concentratie van de deeltjes wordt bepaald uit de dispersie die ze produceren in een invallend licht..

referenties

1. Britannica, E. (s.f.). Nephelometrie en turbidimetrie. Hersteld van britannica.com
2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetry & Nephelometry. Teruggeplaatst van pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Hersteld van technochemical.com
4. Morais, I.V. (2006). Turbidimetrische en Nephelometric Flow Analysis. Opgehaald van repositorio.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Principes van nefelometrie en turbidimetrie. Teruggeplaatst van notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Essentials of Immunology & Serology. Albany, NY: Thompson Learning. Opgehaald uit books.google.co.ve
7. Wikipedia. (N.D.). Nephelometrie (geneeskunde). Opgehaald van en.wikipedia.org