Delen:
Biochemische testsoorten, waar ze voor zijn en belangrijk
de biochemische tests in de microbiologie zijn het een reeks chemische tests die worden uitgevoerd op de micro-organismen die in een monster aanwezig zijn om ze te identificeren; Deze micro-organismen zijn meestal bacteriën. Er is een groot aantal biochemische tests beschikbaar voor een microbioloog.
De keuze van deze tests is echter gebaseerd op voorlopige bevindingen, zoals het Gram-vlekpatroon en de groeicijfers, waardoor de bacteriën aan een bepaalde categorie kunnen worden toegewezen. De biochemische tests zijn voornamelijk gebaseerd op de metabolische eigenschappen van elk type bacterie.
Niet alle bacteriën hebben dezelfde eigenschappen, zodat wordt onderzocht of deze nog bepaald enzym door toevoeging van het substraat en wachten op de reactie te laten optreden. Gewoonlijk wordt deze bepaling gegeven door een verandering van kleur of pH in het kweekmedium.
Minder dan 15 biochemische tests zijn vaak vereist voor de betrouwbare identificatie van een bacterie tot op soortniveau. Het uitvoeren van meer biochemische tests kan het vertrouwen in identificatie vergroten.
De meeste van deze biochemische tests worden uitgevoerd in serum of bloedplasma. Ze kunnen echter ook worden uitgevoerd in andere biologische afscheidingen zoals urine, hersenvocht, pleuravocht en ontlasting, onder andere..
index
- 1 Classificatie
- 1.1 Universeel
- 1.2 Differentiëlen
- 1.3 Specifiek
- 2 soorten biochemische tests
- 2.1 De catalase-test
- 2.2 De oxidase-test
- 2.3 Test van Gezouten Mannitol Agar (MSA)
- 2.4 Coagulase-test
- 2.5 De ureasetest
- 3 Waar zijn de biochemische tests voor??
- 4 Belang
- 5 Referenties
classificatie
De biochemische tests kunnen worden onderverdeeld in 3 groepen:
universeel
Dit zijn de tests die op elk monster kunnen worden uitgevoerd en die de microbioloog begeleiden bij de volgende biochemische tests die moeten worden uitgevoerd om een betrouwbare identificatie te verkrijgen..
voorbeeld
De catalase- en oxidase-test.
differentiëlen
Dit zijn de tests die worden uitgevoerd om de micro-organismen die in het monster aanwezig zijn te identificeren tot op soortniveau.
De identificatie gebeurt op basis van de resultaten van een combinatie van tests, omdat de individuele resultaten niet informatief genoeg zijn om de identificatie te maken.
voorbeeld
IMViC-tests en suikergebruikstests.
specifiek
Het zijn specifieke tests voor een bepaalde set soorten of voor het subtype van een soort. Deze tests worden meestal gedaan om te bevestigen of te identificeren op ondersoortenniveau. Individuele tests zijn op zichzelf informatief.
voorbeeld
De y-glutamylaminopeptidasetest.
Typen biochemische tests
De catalase-test
De catalase-test is een test om de aanwezigheid van katalase-enzym aan te tonen door waterstofperoxide te ontbinden in zuurstof en water. Een kleine hoeveelheid bacteriën wordt toegevoegd aan een druppel waterstofperoxide (3%) op het glaasje.
De katalase test is een eenvoudige test die door microbiologen te helpen identificeren soorten bacteriën en het vermogen van sommige microben ontleden van waterstofperoxide door het enzym catalase bepalen.
Als zuurstofbelletjes waargenomen betekent dat de bacterie het catalase enzym, omdat katalyseert de ontleding van waterstofperoxide in zuurstof en water. Er wordt dan gezegd dat het organisme catalase-positief is (bijvoorbeeld: Staphylococcus aureus).
De oxidase-test
Deze test wordt gebruikt om micro-organismen te identificeren die het enzym cytochrome oxidase bevatten (belangrijk in de elektronentransportketen). Het wordt vaak gebruikt om onderscheid te maken tussen de families Enterobacteriaceae en Pseudomadaceae.
Cytochroomoxidase draagt elektronen over van de elektronentransportketen naar zuurstof (de laatste elektronenacceptor) en reduceert het tot water. Oxidase-testen voorzien in kunstmatige elektronendonor- en -acceptormoleculen.
Wanneer de elektronendonor wordt geoxideerd door de werking van cytochroomoxidase, wordt het medium donkerpaars en wordt het als een positief resultaat beschouwd. Het micro-organisme Pseudomonas aeruginosa is een voorbeeld van een positieve oxidase-bacterie.
Gezouten Mannitol Agar Test (MSA)
Dit type test is zowel selectief als differentieel. De MSA selecteert organismen die kunnen leven in omgevingen met hoge concentraties zout, zoals soorten Staphylococcus in tegenstelling tot de soort Streptococcus, waarvan de groei wordt geremd onder deze omstandigheden.
De differentiële component in deze test is suiker mannitol. Organismen die mannitol kunnen gebruiken als voedselbron zullen bijproducten van fermentatie produceren, die zuur zijn en daarom de pH van het medium verlagen.
De zuurgraad van het medium zorgt ervoor dat de pH-indicator, fenolrood, geel wordt. Voorbeelden van soorten bacteriën die op deze manier kunnen worden onderscheiden, zijn: Staphylococcus aureus (positief omdat het mannitol fermenteert) en Staphylococcus epidermidis (negatief omdat mannitol niet fermenteert).
Coagulase-test
Coagulase is een enzym dat bloedstolsel helpt stollen. Deze test wordt uitgevoerd op positieve grampositieve en catalase-positieve bacteriën om te identificeren Staphylococcus aureus (positieve coagulase) In feite is coagulase een virulentiefactor van deze bacteriesoort.
De vorming van stolsels rond een infectie veroorzaakt door deze bacterie beschermt het waarschijnlijk tegen fagocytose. Deze test is erg handig wanneer u een onderscheid wilt maken tussen Staphylococcus aureus van andere soorten Staphylococcus die negatieve coagulase zijn.
De urease-test
Deze test wordt gebruikt om bacteriën te identificeren die in staat zijn om ureum te hydrolyseren, met behulp van het enzym urease. Het wordt vaak gebruikt om onderscheid te maken tussen geslacht Proteus van andere darmbacteriën.
De hydrolyse van ureum produceert ammoniak als een van zijn producten. Deze zwakke base verhoogt de pH van het medium boven 8,4 en de pH-indicator (fenolrood) verandert van geel in roze. Een voorbeeld van een positieve urease-bacterie is Proteus mirabilis.
Waar zijn de biochemische tests voor??
Biochemische testen in de microbiologie worden gebruikt om ziekten veroorzaakt door microben te diagnosticeren en om behandelingen die worden toegediend om ze te bestrijden te volgen. Bovendien worden ze gebruikt voor het screenen van infectieziekten en voor hun prognose..
Biochemische identificatie van micro-organismen geeft een idee van wat deze micro-organismen zijn in staat is om mogelijke discriminatie van verschillende stammen van dezelfde soort door specifieke biochemische profielen.
Verschillen in specifieke enzymatische activiteiten rapporteren over ecologie, fysiologie of natuurlijke habitat van het organisme, die in sommige gevallen kan worden beschouwd als belangrijke informatie.
belang
Structurele verschillen met betrekking tot de vorm, grootte en rangschikking van bacteriën heel weinig hulp in het identificatieproces, want er zijn vele soorten bacteriën die vorm, grootte en arrangement soortgelijke hebben.
Om deze reden is de identificatie van bacteriën uiteindelijk voornamelijk gebaseerd op de verschillen in hun biochemische activiteiten.
Elke soort bacterie heeft een goed gedefinieerde reeks metabole activiteiten die verschillen van alle andere soorten. Deze biochemische "vingerafdrukken" zijn eigenschappen die worden gecontroleerd door bacteriële enzymen.
Biochemische testen zijn dus belangrijk omdat ze de onderzoeker helpen de ziekteverwekkers in een monster op de juiste manier te identificeren en op deze manier de juiste behandeling aan de patiënt kunnen aanbevelen..
referenties
- Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinische biochemie (8e druk). Wiley-Blackwell.
- Clarke, P.H., & Cowan, S.T. (1952). Biochemische methoden voor bacteriologie. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
- Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinische biochemie (5de ed.). Elsevier Health Sciences.
- Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktisch handboek voor microbiologie (2e ed.). CRC Press.
- Harrigan, W. (1998). Laboratoriummethoden in voedselmicrobiologie (3e ed.). Academische pers.
- Vasanthakumari, R. (2009). Praktische Microbiologie. BI-publicaties Pvt Ltd.