Wat is Simple Staining? Topfuncties



de eenvoudige kleuring is een snelle en eenvoudige kleuringsprocedure waarbij een enkele kleurstof wordt gebruikt, daarom wordt deze eenvoudig genoemd. Het wordt voornamelijk gebruikt om de morfologie en organisatie van cellen in een monster te bepalen.

Natuurlijk hebben de cellen geen kleur, dus is het nodig om ze op een of andere manier zichtbaar te maken wanneer ze in de microscoop worden waargenomen.

Het is belangrijk om te benadrukken dat de kleurstoffen die bij eenvoudige kleuring worden gebruikt, basisch moeten zijn met positieve lading (kationisch), zodat ze spontaan kunnen binden aan de celwand en het cytoplasma.

Deze cellulaire structuren zijn negatief geladen. Dit is de reden waarom de kleurstof, positief geladen, wordt aangetrokken door de cellen en zich er spontaan aan bindt. Aldus zijn alle cellen die in een monster aanwezig zijn snel gekleurd.

Kleurstoffen die worden gebruikt bij eenvoudige kleuring

Er zijn verschillende basische kleurstoffen die in het microbiologische laboratorium kunnen worden gebruikt. De meest gebruikte zijn:

- Methyleenblauw.

- Crystal violet.

- Malachiet groen.

- Basis fuchsin.

Al deze kleurstoffen werken goed in bacteriën omdat ze positief geladen (kationische) gekleurde ionen (chromoforen) hebben.

De kleurtijden voor de meeste van deze kleurstoffen zijn relatief kort. Ze variëren meestal van 30 seconden tot 2 minuten, afhankelijk van de affiniteit van de kleurstof.

Het is belangrijk om in gedachten te houden dat voor het verven van een monster door eenvoudige kleuring, het moet worden uitgebreid en bevestigd aan de glasplaat (schuif); Het uitgebreide en gefixeerde monster wordt een uitstrijkje genoemd.

De 6 stappen om een ​​eenvoudige kleuring uit te voeren

Stap 1

Plaats de dia op een vlekkenrek en breng de gewenste kleurstof aan. Verlaat de overeenkomstige tijd.

Normaal gesproken duurt een eenvoudige kleuring enkele seconden of een paar minuten, afhankelijk van de gebruikte kleur.

observatie

In deze stap is het belangrijk om de aanbevolen tijd voor de gebruikte kleurstof niet te overschrijden, omdat er zich kristallen kunnen vormen op het vel, waardoor er zogenaamde artefacten ontstaan ​​die de morfologie van de cellen vervormen.

Stap 2

Was het uitstrijkje van de glaasje voorzichtig met gedestilleerd water uit een fles, of ook met kraanwater dat langzaam stroomt, totdat de afvoer transparant wordt. Dit duurt meestal 5 tot 10 seconden.

observatie

Breng de waterstraal niet direct op het uitstrijkje aan, om te voorkomen dat de kracht van het monster het monster beschadigt.

Als u geen gedistilleerd water hebt, kunt u zonder problemen kraanwater gebruiken, omdat dit het kleuringsresultaat niet beïnvloedt.

Stap 3

Droog de glijbaan met absorberende papieren handdoeken in één richting en zonder wrijven. Zorg ervoor dat de onderkant van de dia schoon is.

Stap 4

Observeer het gekleurde uitstrijkje in de microscoop. Begin met de meest verre doelen om het gebied dat u wilt observeren meer in detail te lokaliseren. Verander het doel om steeds dichter bij de steekproef te komen.

observatie

Voor het gebruik van de lens met de hoogste vergroting (normaal 100X), moet immersieolie worden gebruikt, omdat dit helpt om het licht beter te laten doordringen en het beeld scherper te maken. Het is niet nodig om een ​​dekglaasje te gebruiken.

Stap 5

Tenslotte, gooi alle monsters weg in een geschikte container die op de juiste manier is gelabeld als "biohazard".

referenties

  1. (2001). Microbiologische toepassingen: Laboratory Manual in General Microbiology (8 th red.). De McGraw-Hill-bedrijven.
  2. Harisha, S. (2006). Een inleiding tot de praktische biotechnologie (1st). Firewall-media.
  3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D.P. (2009). Voorlopige kleuring van bacteriën: eenvoudige vlekken. Huidige protocollen in de microbiologie, (SUPPL 15), 1-5.
  4. Pommerville, J. (2013). Alcamo's Laboratory Fundamentals of Microbiology (10th). Jones & Bartlett Learning.
  5. Prescott, H. (2002). Laboratoriumoefeningen in de microbiologie (5 th). De McGraw-Hill-bedrijven.
  6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principles of Microbiology (1st). Tata McGraw-Hill Onderwijs.