Agarzout en manitol foundation, bereiding en toepassingen

de zoutagar en mannitol of zout mannitol is een vast, selectief en differentieel kweekmedium. Het is gemaakt door Chapman voor de isolatie van pathogene Gram-positieve kokken, in het bijzonder Staphylococcus aureus.

Het is echter ook handig om te isoleren Staphylococcus epidermidis, die soms aanwezig kan zijn als een opportunistische ziekteverwekker, en Staphylococcus saprophyticus, onderkende urinaire ziekteverwekker, naast andere soorten.

Sommige Enterococcen kunnen groeien in dit medium, evenals bepaalde Gram-positieve sporenvormende bacillen.

Dit medium is zeer nuttig in de analyse van klinische monsters, maar het wordt ook gebruikt in de microbiologische studie van voedingsmiddelen en in de kwaliteitscontrole van industriële producten, zoals cosmetica, medicijnen, onder andere..

Gezouten mannitol-agar bestaat uit extracten en peptonen van rund, tripteïne, mannitol, natriumchloride, fenolrood en agar..

index

• 1 Foundation
• 2 Voorbereiding
• 3 Gebruik
• 4 Kwaliteitscontrole
• 5 Laatste overwegingen
• 6 Referenties

stichting

Mannitol-agar is selectief dankzij de hoge zoutconcentratie die het heeft. Zoutgehalte werkt als een remmende substantie en voorkomt de groei van Gram-negatieve bacteriën.

Het is ook differentieel vanwege de aanwezigheid van mannitol-koolhydraat en de fenolrode pH-indicator. Hieruit produceren de bacteriën die mannitol kunnen fermenteren zuren, verzuren het medium, draaien de kolonies en het medium geel.

Aan de andere kant groeien kolonies die mannitol niet fermenteren in het medium en nemen de voedingsstoffen die worden verkregen door de extracten en peptonas van vlees en tripteína. Van daaruit extraheren de bacteriën de koolstof, stikstof, vitaminen en mineralen die nodig zijn voor hun groei.

De kolonies kunnen in dit geval zwak of sterk roze zijn en het medium blijft dezelfde kleur behouden of verandert in fuchsia.

Agar is de stof die zorgt voor de consistentie van het medium.

voorbereiding

Om een ​​liter gezouten mannitolagar te bereiden, wordt 111 g van het gedehydrateerde medium van het handelshuis van voorkeur gewogen en opgelost in 1000 ml gedestilleerd water, met behulp van een fiola.

Warmte wordt toegepast door het medium vaak te verwijderen om het oplossingsproces te verbeteren. Laat het een minuut koken.

Plaats de fiola in de autoclaaf gedurende 15 minuten bij 121 ° C.

Aan het einde van de tijd wordt de fiola uit de autoclaaf gehaald, toegestaan ​​te staan ​​en te worden geserveerd tussen 15 en 20 ml op steriele petrischalen wanneer de temperatuur ongeveer 50 tot 55 ° C is.

Het is toegestaan ​​te stollen, in omgekeerde vorm te bestellen in plaqueros en in de koelkast te bewaren tot het wordt gebruikt. Voordat u een monster plant, moet u wachten totdat de plaat de temperatuur van de omgeving heeft aangenomen.

De platen worden gestript of door zaaien op het oppervlak met een drigalski-spatel. De uiteindelijke pH van het bereide medium moet 7,4 ± 0,2 zijn

De kleur van het gedehydrateerde medium is lichtbeige en de kleur van het geprepareerde medium is oranjerood.

toepassingen

Vanwege zijn hoge selectiviteit is dit medium ideaal voor het planten van monsters met gemengde flora waarin men naar de aanwezigheid van wil zoeken Staphylococcus aureus, als de belangrijkste ziekteverwekker van dit geslacht.

In deze zin is een van de meest voorkomende toepassingen in de microbiologische analyse van monsters van faryngeale exsudaten en loopneus, vooral om asymptomatische dragers van S. aureus.

Sommige landen hebben deze analyse geïmplementeerd als een verplichte vereiste voor mensen die willen werken als voedselverkopers.

Deze controle voorkomt het inhuren van mensen die drager zijn van S. aureus, dus het vermijden van enorme voedselvergiftiging, vanwege de consumptie van voedingsmiddelen die besmet zijn met stafylokokken-enterotoxine.

Het kan ook worden opgenomen in het zaaien van wondinfecties, bloedkweken, CSF, bronchoalveolaire lavage, onder anderen..

Gezouten mannitol-agar is nuttig voor het opnieuw isoleren van kolonies urinekweken van CLED-agar of bloedagar waarvan Gram Gram-positieve coccen in clusters heeft onthuld.

Het is ook geldig in de microbiologische analyse van voedsel, drinkwater, bodem, onder andere toepassingen.

Kwaliteitscontrole

Zodra een partij platen met gezouten mannitol-agar is bereid, is het raadzaam om een ​​kwaliteitscontrole uit te voeren. Controlestammen worden gezaaid om te laten zien of er groei is of niet.

Als een positieve controle, bekende stammen van Staphylococcus aureus. Het moet bevredigend groeien door gele kolonies te ontwikkelen, en het medium krijgt ook dezelfde kleur.

Evenzo is het handig om een ​​bekende stam van te nemen Staphylococcus epidermidis. Het moet bevredigend groeien door roze kolonies te ontwikkelen, en het medium blijft dezelfde kleur behouden of wordt donkerder in een sterkere roze kleur.

Als een negatieve controle worden stammen gebruikt die niet in dit medium zouden moeten groeien. U kunt bijvoorbeeld een bekende stam van planten Escherichia coli of Klebsiella pneumoniae. Het verwachte resultaat is volledige remming, dat wil zeggen geen groei.

Bovendien moet een plaat zonder inoculatie worden geïncubeerd. Daarin zou geen groei, geen verandering van kleur moeten zijn.

Het is belangrijk dat de plaat niet wordt gebruikt als er aanwijzingen zijn voor verslechtering, zoals verontreiniging, uitdroging, verkleuring, enzovoort..

Laatste overwegingen

Bij gebruik van het gezouten mannitol-agarmedium moet met enkele belangrijke aspecten rekening worden gehouden:

-Het verkrijgen van een groei van gele kolonies geeft niet aan dat het is Staphylococcus aureus. Men moet niet vergeten dat sommige stammen van Enterococcus in dit medium kunnen groeien en mannelijke mannitol kunnen fermenteren, evenals bepaalde Gram-positieve sporenvormende bacillen..

Daarom is het belangrijk om een ​​Gram voor de kolonie en een catalase-test uit te voeren.

-Aan de andere kant moet worden overwogen dat andere soorten Staphylococcus anders zijn dan aureus Ze kunnen ook mannitol fermenteren. Daarom is het belangrijk om de kolonie te sub-cultiveren tot een voedingsbodem om van daaruit de coagulase-test uit te voeren.

Onder de Staphylococcus-soorten van klinisch belang voor mannitol bij het fermenteren van mannen zijn: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, onder andere.

Anderen kunnen een variabele reactie geven, dat wil zeggen soms positief en soms negatief. Sommige zijn S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, onder andere.

-Het wordt niet aanbevolen om kolonies rechtstreeks van mannitol agar te nemen om de coagulase-test uit te voeren, omdat de hoge zoutconcentratie van het medium kan interfereren in het resultaat..

-Ten slotte wordt aanbevolen om de platen gezaaid met gezouten mannitol gedurende maximaal 48 uur te laten incuberen, vanwege het feit dat sommige stammen van S. aureus Ze kunnen de mannitol langzaam fermenteren, hoewel dit niet vaak voorkomt.

referenties

1. Laboratoria Britania. Mannitol zoute agar. 2015. Beschikbaar op: britanialab.com
2. "Gezouten Mannitol Agar". Wikipedia, de gratis encyclopedie. 31 oktober 2018, 19:08 UTC. 17 januari 2019, 20:55, beschikbaar op: en.wikipedia.org.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. (5de ed.). Argentinië, redactie Panamericana S.A..
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Microbiologische diagnose van Bailey & Scott. 12 ed. Argentinië. Panamericana S.A Editorial
5. BD Laboratories BD Mannitol zout agar. 2013. Beschikbaar op: bd.com.