Agar Salmonella-Shigella foundation, bereiding en toepassingen

de Salmonella-Shigella-agar ook bekend als SS-agar, is een matig selectief en differentieel medium, speciaal ontworpen voor de isolatie van enteropathogene bacteriën van de geslachten Salmonella en Shigella, zowel uit milieu- als klinische monsters..

De SS-agar heeft een complexe samenstelling; Het bestaat uit vleesextract, pepton, lactose, galzouten, natriumcitraat, natriumthiosulfaat, ferricitraat, agar, neutraal rood, briljantzuurgroen en gedestilleerd water. Gezien zijn grote selectiviteit is het mogelijk om monsters met overvloedige gemengde flora te planten.

In de laboratoria voor microbiologie wordt het Salmonella-Shigella-medium veel gebruikt om de aanwezigheid van Salmonella en Shigella in monsters van diarree, feces, drinkwater en voedsel te onderzoeken.

Soms is het noodzakelijk om voorverrijkingsbouillons (lactosemonobloem) en verrijking (selenietcystinebouillon) te gebruiken om Salmonella-stammen te herstellen.

Deze stappen zijn vereist wanneer het bestaan ​​van Salmonella in zeer kleine hoeveelheden wordt vermoed, of wanneer de stam kan worden mishandeld door processen die kenmerkend zijn voor industriële productie, voornamelijk bewerkte voedingsmiddelen. Het is ook raadzaam krukmonsters te verrijken van patiënten die met antibiotica zijn behandeld.

Vervolgens kan de verrijkingsbouillon worden gezaaid in agar Salmonella Shigella en andere soortgelijke middelen, zoals xylose agar, lysine deoxycholaat (XLD) agar en Hektoen enterische (HE).

index

• 1 Foundation
  • 1.1 Voeding
  • 1.2 Consistentie
  • 1.3 Selectief
  • 1.4 differentieel
• 2 Voorbereiding
• 3 Gebruik
• 4 Beperkingen
• 5 kwaliteitscontrole
• 6 Referenties

stichting

Elke component van het Salmonella-Shigella-kweekmedium heeft een specifieke functie en het mengsel als geheel geeft het de eigenschappen die het karakteriseren.

Voedzame kracht

Vleesextract en pepton (caseïne digest en dierlijk weefsel) de gewenste (stikstof, koolstof en vitaminen) voor de ontwikkeling van micro-organismen die in staat tolereren de overige componenten.

consistentie

De agar-agar is verantwoordelijk voor het leveren van solide consistentie aan het medium.

selectief

Dit medium is zeer selectief omdat het galzouten, natriumcitraat en heldergroen bevat. Daarom remt het de groei van alle Gram-positieve bacteriën en de meeste Gram-negatieve bacillen, inclusief enkele coliformen.

Terwijl bacteriën van het geslacht Salmonella en sommige stammen van Shigella deze verbindingen ondersteunen.

Voornamelijk is het geslacht Salmonella zeer resistent tegen galzouten, zozeer zelfs dat ze in de galblaas kunnen leven van sommige dragerpatiënten die constant de bacteriën via de uitwerpselen verdrijven.

differentiaal

Lactose is het fermenteerbare koolhydraat dat helpt om de lactose-fermenterende stammen te onderscheiden van de niet-fermenterende stammen. Deze eigenschap wordt bewezen door de aanwezigheid van de pH-indicator, die in dit medium fenolrood is.

De lactose-fermenterende stammen geven rode kolonies, terwijl de niet-fermenterende stammen kleurloos zijn. Dit kenmerk is belangrijk, omdat Salmonella en Shigella geen lactose fermenteren.

Aan de andere kant bevat dit medium natriumthiosulfaat als een bron van zwavel en ijzer (III) citraat als een bron van ijzer. Beide verbindingen zijn in staat de bacteriën te onderscheiden die in staat zijn waterstofsulfide te produceren. Deze reageren om een ​​zwart neerslag van onoplosbaar en zichtbaar ferrisulfide te vormen.

Deze eigenschap heeft enkele stammen van het geslacht Salmonella. Normaal gesproken zijn hun kolonies kleurloos vlak met een zwarte stip in het midden ervan. De rest van de salmonella's produceren geen H₂S en ontwikkelen als kleurloze kolonies.

Aan de andere kant zijn kolonies van het geslacht Shigella kleurloos vlak zonder zwart te maken.

voorbereiding

Dit betekent dat het heel eenvoudig is om te bereiden.

Weeg 63 g gedehydrateerd handelsmedium af en los op in 1 liter gedestilleerd water. Verwarm de oplossing en roer. Het mengsel kan tot minuten koken.

Dit medium mag niet worden geautoclaveerd. Na het oplossen wordt het direct op enkele of dubbele steriele platen geserveerd.

Wanneer ze hard worden, worden ze op een omgekeerde manier gerangschikt in plaquemakers en bewaard in een koelkast (2-8 ° C) totdat ze worden gebruikt.

Het medium na de bereiding moet pH 7,2 ± 0,2 en oranjerood zijn.

Het is belangrijk om de platen te laten temperen voordat de monsters worden gezaaid. Je kunt het originele monster direct uitzaaien, materiaal afvoeren op een deel van de agar en dan uitstralen door uitputting.

In het geval van het gebruik van verrijkte bouillon, een deel van de seleniet bouillon passeren en zaaien met drigalski spatel.

Incubeer bij 37 ° C gedurende 24 uur in aerobiose.

Houd er rekening mee dat de hoeveelheid grammen om te wegen en de uiteindelijke pH van het medium kan variëren van het ene handelshuis tot het andere. De basisplaat van het medium brengt altijd de indicaties voor de bereiding ervan.

gebruik

Het wordt vaak gebruikt bij de analyse van stoelgangculturen en bij de microbiologische studie van restwatermonsters, drinkwater en voedsel.

Vaak worden dubbele platen bereid, aan de ene kant wordt Salmonella-Shigella-agar geplaatst en aan de andere kant XLD-agar.

beperkingen

-Sommige stammen van Shigella groeien niet in dit medium. Daarom wordt het niet aanbevolen voor primaire isolatie van dit geslacht.

-Niet elke heldere kolonie met een zwart centrum is indicatief voor Salmonella; biochemische tests moeten worden uitgevoerd om een ​​juiste identificatie te maken, aangezien de kolonies van sommige stammen van Proteus niet te onderscheiden zijn van die van Salmonella.

-Het gedehydrateerde medium moet voorzichtig zijn met blootstelling aan de omgeving, omdat het erg hygroscopisch is. Daarom moet het in een droge en goed gesloten omgeving worden bewaard. Open voor zeer korte periodes.

-Na verloop van tijd kunnen de galzouten in het medium neerslaan, waardoor een afbeelding ontstaat die lijkt op een gematteerd binnen de agar, maar dit heeft geen invloed op de resultaten.

-Sommige stammen van Shigella kunnen langzaam lactose fermenteren.

Kwaliteitscontrole

Om aan te tonen dat het medium correct werkt, is het raadzaam om gekende of gecertificeerde controlestammen te planten en te observeren of de groei voldoet aan de verwachte kenmerken.

Voor dit doel, stammen van E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium of Enterococcus faecalis.

De verwachte resultaten zijn:

Escherichia coli --roze bolle kolonies.

Enterobacter en Klebsiella- grote kolonies en rode of roze mucoïde.

Shigella flexneri --heldere of kleurloze platte kolonies.

Salmonella typhimurium - kleurloze kolonies met zwart centrum.

Enterococcus faecalis-- totale remming.

referenties

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella-agar. 2009. Beschikbaar bij: f-soria.es
2. BD-laboratorium. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Beschikbaar op: bd.com
3. Laboratoria Britania. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Beschikbaar op: britanialab.com
4. Valtek-diagnose. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar) .2010. Beschikbaar bij: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Microbiologische diagnose van Bailey & Scott. 12 ed. Redactioneel Panamericana S.A. Argentinië.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. 5e druk. Redactioneel Panamericana S.A. Argentinië.